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​导致保留时间重复性差的因素有哪些?

发布日期:2017-12-28 作者:郑州谱科 点击:

     导致保留时间重复性差的因素有哪些?


郑州谱科商贸有限公司成立于2008年,是专注于销售实验室使用的科研教学仪器供应商,同时为广大的科学工作者提供各种色谱试剂,Merck色谱试剂,配件耗材及标准品公司技术力量雄厚,管理水平先进,主要经营分析仪器,通用实验设备,成套设备,化工产品等,广泛服务于国内高校科研、教学、卫生防疫、食品加工、石油、化工、制药、环保、商检、医疗等各企事业单位。下面郑州谱科商贸就来解答下:导致保留时间重复性差的因素有哪些?


  移动相组成


  想获得重复性好的结果就需要在移动相混合配制时采用称量法。在配制水/乙醇30/70(体积比)溶液时,称取300.0克(300 mL X 1.0 g/mL)水同546.0克(700 mL X 0.78 g/mL)乙醇相混合。


  特别是将脂肪醇当作极性添加组分时,避免采用高效液相色谱将添加组分直接在线泵入与溶剂主成分混合。


  使用每次新鲜配制的移动相,双组分移动相的组成常会因为挥发原因而发生改变。

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  温度漂移


  5℃上下的偏差会导致样品保留时间上+/-10%左右的漂移。即使在常规温度下工作也建议使用色谱柱温箱。


  pH控制


  酸性和碱性样品的保留时间视pH环境而定。0.1个pH单位会导致保留时间发生10%的漂移。因此建议pH工作环境至少保持在样品pKa的2个pH单位区间外。


  平衡不完全


  建议至少使用10倍柱体积的移动相对反相色谱柱进行平衡操作,针对含有缓冲成分的移动相则在分析操作前至少需要20倍柱体积的平衡工作容量。确保所有移动相路径均经过足够的移动相涤洗。正相色谱柱需要耗费10倍于反相色谱柱的平衡时间。纯硅胶基质色谱柱可能的平衡时间长达数小时,特别要留意正相体系中的水份含量。多数可重复的结果都是特意在移动相中添加0.05%的水份后取得的。


  去润湿化


  高极性移动相可以被从填料微球的憎水性内孔系统内排斥出来,导致微球可接触的表面积越来越少,由此导致保留时间的逐渐变少。参见“预装色谱柱能在100%水溶液组成的移动相中工作吗?”


相关标签:郑州谱科商贸,Merck色谱试剂,色谱柱

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